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細胞活性氧(ROS)檢測

檢測概述.png

利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧的檢測。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內后,可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF,檢測DCF的熒光就可以知道細胞內活性氧的水平。

| 實驗流程 

Step1:制成單細胞懸液(組織樣本)

Step2:溶血(細胞樣本無需進行此步驟)

Step3:離心去上清

Step4:調整細胞密度

Step5:加入相應的熒光探針

Step6:孵育

Step7:洗滌后離心去上清

Step8:上機檢測

| 實驗費用 :根據客戶檢測需求以及實驗復雜程度進行報價

| 客戶注意事項 

1.標本收集與保存

>> 組織樣品:新鮮組織放入液氮或-70度保存,組織不少于100mg(約綠豆大小);

>> 培養細胞:通過細胞計數取不少于2000000個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-70℃,避免反復凍融);

>> 血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-70℃可長期保存,避免反復凍融);

>> 血清或細胞培養液標本:離心去掉雜質后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可長期保存,避免反復凍融)。

2.樣本運輸:可選以下任何的一種方式寄送標本

>> 組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后加冰袋運輸;

>> 細胞樣本也可以直接快件寄送培養瓶(密封保證不污染,培養液不漏出,細胞不要長得太滿,50%左右,灌滿培養液);

>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出,視路途遠近2-3天可到達)。

| 送檢與交付標準 

樣品類型樣品需求運輸條件
組織離體后組織制成單細胞懸液,加入PBS培養基內常溫運輸
活細胞樣本量:1*106個細胞/TEST,加入PBS培養基內常溫運輸
血液將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內常溫運輸

優勢.png儀器.png客戶.png檢測流程.png送檢流程.png

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