
利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧的檢測。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內后,可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF,檢測DCF的熒光就可以知道細胞內活性氧的水平。
| 實驗流程
Step1:制成單細胞懸液(組織樣本)
Step2:溶血(細胞樣本無需進行此步驟)
Step3:離心去上清
Step4:調整細胞密度
Step5:加入相應的熒光探針
Step6:孵育
Step7:洗滌后離心去上清
Step8:上機檢測
| 實驗費用 :根據客戶檢測需求以及實驗復雜程度進行報價
| 客戶注意事項
1.標本收集與保存
>> 組織樣品:新鮮組織放入液氮或-70度保存,組織不少于100mg(約綠豆大小);
>> 培養細胞:通過細胞計數取不少于2000000個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-70℃,避免反復凍融);
>> 血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-70℃可長期保存,避免反復凍融);
>> 血清或細胞培養液標本:離心去掉雜質后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可長期保存,避免反復凍融)。
2.樣本運輸:可選以下任何的一種方式寄送標本
>> 組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后加冰袋運輸;
>> 細胞樣本也可以直接快件寄送培養瓶(密封保證不污染,培養液不漏出,細胞不要長得太滿,50%左右,灌滿培養液);
>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出,視路途遠近2-3天可到達)。
| 送檢與交付標準
樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
組織 | 離體后組織制成單細胞懸液,加入PBS培養基內 | 常溫運輸 |
活細胞 | 樣本量:1*106個細胞/TEST,加入PBS培養基內 | 常溫運輸 |
血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內 | 常溫運輸 |