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蛋白表達與純化

原核蛋白表達是將植物、動物、微生物等目的基因插入合適載體后導入大腸桿菌表達出大量目的蛋白,這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應用。蛋白表達技術包括原核蛋白表達與純化、酵母蛋白表達與純化、昆蟲細胞蛋白表達與純化、哺乳動物細胞蛋白表達與純化。原核蛋白表達系統是成熟可靠的蛋白表達系統,能快速表達純化各種不同來源蛋白,所制備的重組蛋白可用于藥物篩選、結構生物學研究、細胞生物學研究、蛋白質組學研究等的一系列生物醫學領域的研究。

為了保證蛋白純化的質量,菲優特檢測生物團隊建立了嚴格的產品質控體系及一整套完善的客戶服務流程、保密制度,以確保為客戶提供優質的產品及成熟的服務。根據客戶的需求,提供從基因合成,載體構建,基因表達,蛋白純化、檢測等一站式服務,菲優特檢測生物團隊在優化基因密碼子、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取、特定蛋白純化系統的選擇、蛋白生產工藝的優化等方面,擁有較多的經驗,可以滿足客戶個性化的需求。

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 原核蛋白表達(E. coli )技術服務內容 

1、基因合成

提供客戶:合成的基因及測序序列。

2、載體構建(表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取。)

擴增并抽提構建好的表達質粒。 將表達質粒轉化到高效的E. coli表達菌株中。 至少挑選數個陽性克隆于LB培養基中擴增并誘導表達目標蛋白。 電泳檢測,菌株中目標蛋白的表達情況,并挑選合適的單克隆菌株用于目標蛋白的表達。

提供客戶:重組質粒的表達菌株及表達檢測報告。

3、搖瓶培養重組細菌,誘導表達目標蛋白

通過親和、離子交換、疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

利用蛋白酶去除不需要的純化標簽(Tag),再純化獲得所需的目標蛋白(可選,構建表達載體時需加入合適的蛋白酶切位點)。

通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

提供客戶:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕?Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達95%以上。

4、大規模蛋白制備

蛋白生產工藝的優化

提供客戶:合格的目標蛋白及服務報告。

5、蛋白復性服務

利用不同復性緩沖液的體系,對目標蛋白進行小量復性試驗提供復性后樣品供客戶檢測。 可根據客戶要求,按照其中一種樣品的復性條件制備小量的復性蛋白。強耀生物科技有限公司可提供具體的復性緩沖液配方及復性工藝。

其他:除菌,凍干等進一步加工。

提供客戶:加工后的最終產品及相關實驗和檢測報告。

菲優特檢測秉承“科學 · 獨立 · 誠信 · 高效”的服務理念,以專業、專注的態度為您提供精確的檢測技術和咨詢服務。

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