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穩定細胞株構建
構建穩定細胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。穩定細胞株的構建周期長、難度大,每一步都很關鍵,尤其是細胞轉染,常用物理方法(電轉)、化學方法(脂質體等)、生物方法(病毒),根據不同的實驗條件,選擇最好的方法,來達到實驗目的。
菲優特檢測是您在細胞生物學領域的專業合作伙伴,為您的細胞操作實驗提供專業的、可靠的解決方案。
菲優特檢測生物團隊提供哺乳動物穩定細胞系構建服務,與瞬時轉染不同,穩定細胞系構建是指外源基因進入受體細胞并整合到細胞的染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因,穩定細胞株表達的蛋白/抗體穩定性更好和批次差異性更小。
構建穩定細胞系最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,得到可穩定表達目的蛋白,或者穩定表達沉默特定基因的細胞株。
菲優特檢測秉承“科學 · 獨立 · 誠信 · 高效”的服務理念,以專業、專注的態度為您提供精確的檢測技術和咨詢、科研服務。