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反轉錄PCR
反轉錄PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)又稱為逆轉錄PCR。其原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得目的基因或檢測基因表達。
RT- PCR即逆轉錄PCR,是將RNA的逆轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增反應(PCR)相結合的技術。RT-PCR技術靈敏而且用途廣泛,可用于檢測細胞/組織中基因表達水平,細胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能,該技術主要用于:分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統。
反轉錄PCR服務流程
1、mRNA抽提
2、反轉錄合成cDNA第一鏈
3、PCR擴增雙鏈cDNA
4、純化PCR產物,克隆PCR產物到標準載體測序
5、亞克隆到其他表達載體(可選)
菲優特檢測秉承“科學 · 獨立 · 誠信 · 高效”的服務理念,以專業、專注的態度為您提供精確的檢測技術和咨詢、科研服務。